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微流控单细胞包封系统
点击次数：1172 更新时间：2022-12-07
 

微液滴的单细胞包封是采用微流控系统生成微液滴进行单细胞包封的技术，采用压力控制器驱动的微流控装置可生产皮升级大小的液滴，可在单细胞水平上进行Hela等细胞的包封及进一步的分析。Elveflow 提供微流控单液滴包封的全套仪器设备及相关的用户指导手册，用于微液滴的单细胞包封及单细胞测序。

微流控单细胞包封的应用包括:

肿瘤学（洞察小细胞亚群携带的突变）

免疫学（区分不同的免疫细胞群或表征免疫细胞群）

神经学（获取详细的单细胞图谱，以了解和识别大脑中不同类型的神经元及其连接分子）

发育生物学（逐个细胞绘制胚胎的整个发育过程）

单细胞组学（揭示组织样本的细胞异质性）

Elveflow 采用微液滴进行单细胞包封的仪器配置如下：

  1. OB1 压力控制器，至少有两个      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量传感器，0.4–7 μL/min，用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量传感器      4.2–80 μL/min，用于细胞悬液

  4. 1 x 套件鲁尔锁启动连接件

  5. 2 x 15 mL 储液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于观察的显微镜

  8. 用于成像的摄像头（可选）

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性剂

  10. Aquapel用于疏水处理（可选）

微流控芯片是微液滴单细胞包封的关键部件，可采用流动聚焦的微流控微液滴生成芯片，材质是PDMS ，微通道可以用Aquapel进行处理，形成疏水性的微流体通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片，可获得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片，可获得50-80μm的液滴

单细胞包封微流控芯片，生成20-50 μm的液滴。

这些芯片有2个入口，1个出口，入口分别是细胞悬浮液和油相，可实现单细胞包封。

如果想进行单细胞包封后测序，可采用4个入口和1个出口的微流控芯片，4个入口分别用于细胞悬浮液，Barcoded 水凝胶珠，裂解缓冲液和油相。

例如采用细胞溶液,13.57X105细胞/ml, 生微液滴平均直径为51.2μm（CV=2.4%）。

参考文献：Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 
 

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